如何对不同样本的miRNA进行分离和定量? 点击:326 | 回复:0



amyjetamy

    
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发表于:2021-03-31 16:22:56
楼主

和大家聊聊miRNA酶联免疫分析,可能大家不知道miREIA是个啥,它的完整名称是microRNA Enzyme Immunoassay,是BioVendor用于miRNA定量的一种新方法。下面简单介绍一下:

 

microRNA Enzyme Immunoassay(以下简称“miREIA”)的检测原理:

将生物素标记的特异性DNA寡核苷酸与样本中分离出的miRNA杂交。 然后将DNA / RNA杂交体转移到固相上,固相涂有对完美匹配的RNA / DNA-生物素杂交体的特异单克隆抗体。然后将洗涤后的固相与链霉亲和素-HRP偶联物一起孵育,并通过发色底物?3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)进行显色观察,吸光度与血液样本中存在的特定miRNA种类的浓度成比。

miREIA.png

 

同时测试miREIA在各种生物样品中的性能。使用miREIA试剂盒对从全血,HeLa细胞,外周血单核细胞,结直肠癌组织,关节滑液,唾液和尿液样本中分离的miRNA进行定量,结果表明,该miREIA试剂盒可以很好的对上述所有样本中的miRNA进行定量,检测结果如下:

miREIA-1.png

全血样本中miRNA的分离及定量:将全血收集到PAXgene血液RNA收集管中。 使用RNA分离试剂盒(RIK001)分离RNA,该试剂盒旨在从培养的细胞,人/动物组织,植物组织和全血中分离RNA。 通过miREIA试剂盒测量了十二种不同miRNA的浓度。

miREIA-2.png

Hela细胞样本中miRNA的分离及定量: 使用 RNA分离试剂盒(RIK001)从HeLa细胞中分离RNA。8种不同miRNA的浓度由miREIA试剂盒测定.

miREIA-3.png

PBMC细胞样本中的miRNA定量:采用His-topaque密度梯度离心法从全血中分离外周血单核细胞(PBMC)。使用RNA分离试剂盒(RIK001)分离RNA。7种不同mirna的浓度由miREIA试剂盒测定.

miREIA-4.png

直肠癌组织样本中miRNA提取及定量:切除获得的结直肠癌(CRC)组织被稳定并储存在RNAlater溶液中。使用RNA分离试剂盒(RIK001)分离RNA。8种不同mirna的浓度由miREIA试剂盒测定.

miREIA-5.png

关节滑液样本中miRNA的分离及定量: 使用血浆/血清RNA分离试剂盒(RIK002)从滑液中分离RNA。 通过miREIA试剂盒测量了五个不同miRNA的浓度.

miREIA-6.png

唾液样本中miRNA的分离及定量: 使用血浆/血清RNA分离试剂盒(RIK002)从唾液中分离RNA。 通过BioVendor miREIA试剂盒测量了两种不同的miRNA的浓度.

miREIA-7.png

尿液样本中miRNA的分离及定量: 使用血浆/血清 RNA分离试剂盒(RIK002)从尿液中分离RNA。通过miREIA试剂盒测量了两种不同miRNA的浓度。

 

文章来源:艾美捷科技




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