全血样品中游离cf-DNA和cf-RNA保存管的操作方法 点击:399 | 回复:0



amyjetamy

    
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发表于:2021-03-29 16:39:27
楼主

关于液体活检,来聊聊全血样品中游离cf-DNA和cf-RNA是如何保存和收集的。那么cf-DNAcf-RNA是什么呢?

 

cf-DNA,就是cell free DNA,在血液中游离的自身DNA而已,这些DNA多是从身体的细胞或者血球破裂释放出来的,一般认为是无害的,很快会被自身清理掉,由此可见cf-RNA同理。

 

液体活检样本多种多样,目前来说,cf-DNA和cf-RNA:外周血中游离的核酸小片段DNARNA源自正常细胞或肿瘤细胞代谢与凋亡,具有J大的临床应用价值。

 

那么问题来了,如何收集保存全血样品中游离cf-DNA和cf-RNA的呢?

 

答案很简单——全血样品中游离cf-DNAcf-RNA保存管。

 

Norgen cf-DNA/cf-RNA保存管是一种封闭的真空塑料管,用于在储存和运输期间收集和保存人全血样本中的cf-DNA、循环肿瘤DNAcf-RNA和循环肿瘤细胞。将这些试管与Norgen的血浆/血清无细胞循环DNA纯化试剂盒或Norgen的血浆/血清RNA纯化试剂盒结合使用能够在非常小的洗脱体积中纯化和浓缩无抑制剂的cf DNA/ct DNA/cf RNA

 

从诺根的cf-DNA/cf-RNA防腐管中回收的血浆也与任何其他cf-DNA/cf-RNA纯化方法兼容。纯化的cf-DNAct-DNAcf-RNA与任何下游应用分析兼容,包括PCRqPCRrt-qPCR、甲基化敏感PCRSouthern印迹分析、基因表达分析、微阵列和NGS

 

全血样品中游离cf-DNA和cf-RNA保存管的工作流程图:

cf-DNA.jpg

使用前确保阅读产品说明书和操作规程

 

步骤:

重要:在抽血后立即将管倒转5次以确保防腐剂与样品均匀接触。

一次倒转是指手腕完全转动180度,手心处向内转变为手背处向内。

完成此步骤后,请勿再次混合cf-DNA和cf-RNA保存管的内容物。

重要:在制备血浆之前不能混合管内的内容物。任何混合都可能导致严重的溶血。

cf-RNA.jpg

 

特点:

1.无固定剂的防腐剂,没有DNA的交联;

2.将cf-DNAct-DNA 和 cf-RNA在环境温度下保存长达30天,在37°C下保存长达8天;

3.在环境温度下将cf-RNA保存30天;

4.在环境温度下保存循环肿瘤细胞(CTC)长达14天;

5.运输后没有血浆体积损失;

6.防止溶血,可以更好地分离血浆;

7.防止血细胞凋亡和基因组DNA片段化;

8.产生高质量的血浆cf-DNAct-DNAcf-RNA

9.用10 mL采血管抽取8.4 mL血液。

 

全血样品中游离cf-DNA和cf-RNA保存管-各品类横向对比】

cf DNA丨RNA.png

 

文章来源:艾美捷科技




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