腺苷作为一种遍布人体细胞的内源性核苷,可直接进入心肌经磷酸化生成腺苷酸,参与心肌能量代谢和扩张冠脉血管;腺苷在中枢神经系统中,它对神经传递的调节及对抵抗缺血性与疾病性神经伤害等方面具有重要作用;同时腺苷作为腺苷脱氨酶的作用底物,其含量变化也会间接反应腺苷脱氨酶的体内代谢水平,而腺苷脱氨酶活性的检测对于临床许多疾病的诊断都具有重要参考价值。
长期以来一直认为大脑中神经元抑制性调节主要是GABA能神经元的“专有特权”,而Nature重磅成果的《Negative feedback control of neuronal activity by microglia》给我们带来了全新的认知,它揭示:小胶质细胞的新功能通过腺苷-腺苷受体信号通路负反馈抑制神经元活动。
Nature作者团队,是如何精准检测腺苷Adenosine的含量呢?艾美捷腺苷检测试剂盒:适用于血清、血浆、尿液、细胞或组织裂解液。
名称 | 腺苷检测试剂盒 |
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检测方法 | 荧光法 |
样本类型 | 血清、血浆、尿液、细胞或组织裂解液 |
实验原理 | CellBiolabs的腺苷检测试剂盒可测量生物样品中的总腺苷。腺苷通过腺苷脱氨酶(ADA)转化为肌苷,然后肌苷转化为次黄嘌呤通过嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)。zui后,次黄嘌呤被黄嘌呤氧化酶(XO)转化为黄嘌呤和过氧化氢。产生的过氧化氢然后用高特异性荧光探针。辣根过氧化物酶催化探针和过氧化氢之间的反应,它们以1:1的比例结合。将样品与已知浓度的96孔微量滴定板格式中的腺苷标准品。样品和标准品孵育15分钟,然后用标准96孔荧光读板仪读取。 |
试剂盒组分 | 1. Adenosine Standard 2. 10X Assay Buffer 3. Fluorometric Probe 4. HRP 5. Adenosine Deaminase 6. Purine Nucleoside Phosphorylase 7. Xanthine Oxidase |
保存条件 | 将 10X Assay Buffer 储存在室温下,并将试剂盒的其余部分储存在-20℃。荧光探针对光敏感,必须相应地存放。避免多次冷冻/解冻循环。 注意:三种酶中的任何一种在次解冻后,都可以分成较小的等份并储存在-20℃。 |
腺苷检测试剂盒原理与标曲展示:
腺苷检测试剂盒发表的Nature结果鉴赏:
Nature,doi: 10.1038/s41586-020-2777-8.
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