今天给大家带来一款荧光法双链DNA检测工具—Pico488 dsDNA 定量试剂盒,Pico488是一种J为灵敏的荧光核酸染料,常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建,DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义,疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。
Pico488仅在与DNA双链结合后才发出荧光,且所产生的荧光与DNA浓度呈正比,在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下,可以选择性地检测低至pg级别的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性,且几乎无序列依赖性,可以较精确地测量多个来源的DNA,包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物,可用荧光分光光度计或荧光酶标仪读数,Ex/Em=503nm/525nm。
相比传统的方法,如紫外吸光法(A260)、探针杂交法、Hoechst 33258染料法等,Pico488 dsDNA 定量具有以下优势:
①灵敏度高:数量级较UV吸光读数更敏感,检测范围为:1pg/ul–5ng/ul,可节省宝贵的样品;
②特异性强:在等摩尔的RNA存在的条件下,对dsDNA具有特异性;
③耐受性好:耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA;
④易于使用:只需在样品中加入染料,等待5分钟,然后读数即可,且适用于24和96孔板;与市面上的大多数荧光酶标仪和荧光计兼容;
⑤适用范围广:可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。
艾美捷 Pico488 dsDNA 定量试剂盒应用:
测定微量的DNA残留(如疫苗生产);对DNA样品进行较精确定量
适用检测设备及建议上样量:
引用文献赏析
1.Caza, F.; Granger Joly de Boissel, P.; Villemur, R.; Betoulle, S.; St-Pierre, Y. Liquid biopsies for omics-based analysis in sentinel mussels. PLoS One, 2019, 14(10), e0223525. doi: 10.1371/journal.pone.0223525
2.Crupi, A.N.; Nunnelee, J.S.; Taylor, D.J.; Thomas, A.; Vit, J.-P.; Riera, C.E.; Gottlieb, R.A.; Goodridge, H.S. Oxidative muscles have better mitochondrial homeostasis than glycolytic muscles throughout life and maintain mitochondrial function during aging. Aging, 2018, 10(11), 3327–3352. doi: 10.18632/aging.101643
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