B细胞ELISpot是对分泌的免疫球蛋白进行直接检测的有力工具。可用来直接计数抗体分泌细胞(ASCs)和长期记忆B细胞。相对于常用的细胞流式而言,B细胞ELISpot能在十万个细胞中实现对单个抗原特异性B细胞进行定量检测,因而具有J高的灵敏度。B细胞ELISpot的主要应用于检测B细胞对感染和疫苗接种引起的反应。
B细胞ELISpot检测需要捕获和检测抗体或抗原,采用夹心法对抗体分泌细胞ASCs进行计数。总Ig B细胞ELISpot(A)捕获和检测所有的ASC抗体,会以两种方式同时进行。一种是反向ELISpot(B),利用标记抗原进行检测;另外一种是传统的ELISpot (C):将抗原包被在孔板上,利用标记抗体进行检测。不管是哪种方式,每一个斑点都只对应一个细胞。
反向ELISpot在检测抗原特异性细胞方面具有几大优势:它产生的斑点更加清晰,同时不存在抗原变性的风险;此外,它还大大减少了每次检测所需的抗原数量。
Mabtech B细胞ELISpot研究工具适用多种种属,产品优质,发表多篇高分文章。
1.Mouse IFN-γ ELISpot PLUS kit (ALP)
小鼠干扰素Y 酶联免疫斑点法PLUS(ALP)非常适合需要方便、灵敏分析的用户。该试验是为计数分泌小鼠干扰素的细胞而设计的-γ. 试剂盒包括预先涂有单克隆抗体、生物素化检测抗体、链霉亲和素ALP和即用BCIP/NBT-plus底物的ELISpot平板。
预涂板减少了分析时间,zui大限度地减少了变异性。小鼠干扰素-γ ELISpotPLUS试剂盒也可用于链霉亲和素HRP和TMB底物。
2.Human IFN-γ ELISpot PRO kit (ALP)
人干扰素Y 酶联免疫斑点法PRO(ALP)具有预涂层板和一步检测功能。该试剂盒可以对分泌人干扰素的细胞进行计数-γ 包含单克隆抗体预包被的ELISpot板、一步检测的ALP结合抗体和BCIP/NBT+底物。人T细胞多克隆激活剂(mAb-CD3-2)作为细胞因子分泌的阳性对照。预涂板和一步检测使分析更加快速,变异性zui小化。
文章来源:艾美捷科技
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