血清学检测在临床决策中起着至关重要的作用,免疫分析是目前可用的zui强大,zui灵敏的血清学检测方法之一,它基于抗原抗体之间的高度特异性结合,即使在低浓度下也能进行定性和定量检测。当选择用于夹心法检测的抗人二抗时(图1A),需要考虑一抗的种属,并使用与该物种有zui小交叉反应的二抗。
尽管免疫测定的功能和目的有所不同,但为了在临床上获得准确,可靠数据,开发血清学试剂盒时,高质量试剂至关重要。抗人二抗的质量是开发免疫测定试剂盒时的关键考虑因素,二抗需要谨慎选择,因为它们会结合一种一抗的多个表位上,从而增强了信号的灵敏度和选择性。
在免疫分析中选择合适的二抗时的考虑因素以及抗体的特征,Jackson 二抗为例:
1.抗体来源:人体样品的血清学检测应使用抗人二抗,以zui大程度地减少非特异性结合,以zui大程度降低背景信号和假阳性。Jackson 二抗可以提供多种来源的抗人二抗,包括羊驼,驴,山羊,小鼠和兔子。
2.产品类别:二抗可以是完整的免疫球蛋白(Ig)G,也可以是F(ab')2和Fab片段,完整的IgG分子可适用于大多数检测,而F(ab')2和Fab片段可用于避免与具有Fc受体的活细胞的非特异性结合。Jackson 二抗可以提供完整IgG形式的二抗以及F(ab')2和Fab片段
3.特异性:根据所需免疫测定的特异性,可以制备针对整个Ig分子的二抗,以及针对于Fc或F(ab')2结构域特异性的二抗。Jackson 二抗可以提供针对于对整个人源Ig分子的二抗,以及针对于Fc和F(ab')2结构域特异性的二抗。
4.亚型:大多数免疫测定均只检测IgG型抗体,这种类型抗体占总血清Ig的?75%,是次级免疫反应的一部分。但是,血清中同时也存在IgM和IgA,而且二抗只对同亚型一抗的具有特异性。Jackson 二抗可以提供对IgG,IgM,IgA,IgG+IgM和IgG+IgM+IgA一种或几种亚型有特异性的二抗。
5.亲和纯化和交叉吸附:由于在Ig结构域具有高度的结构保守性,建议对抗体进行亲和纯化并进行交叉血清吸附的,以减少交叉反应的可能性。免疫亲和层析可用于分离亲和纯化的抗体。Jackson 二抗可以选择已进行物种交叉吸附的抗体,交叉吸附相关信息会在对应产品说明括号中提供,表示为“ min X”,“X”为相关物种的缩写。
6.偶联标记:二抗通常与分子偶联,例如酶,荧光探针或有色颗粒。免疫测定的检测系统将确定标记物的种类。Jackson抗人二抗可以与多种标记物偶联,包括生物素,AP,HRP,荧光基团和胶体金纳米颗粒。
Jackson ImmmoResecarch是专业从事生产和销售亲和纯化的二抗和纯化免疫球蛋白的公司,位于美国宾夕法尼亚。也是专业从事生产和销售亲和纯化的二抗和纯化免疫球蛋白的公司。
艾美捷 Jackson研究领域主要包括:各种纯化的二抗、标记的二抗(AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记)、胶体金试剂等。
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