划痕实验之细胞划痕试验试剂盒解决方案 点击:444 | 回复:0



amyjetamy

    
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发表于:2021-08-04 16:34:43
楼主

细胞划痕是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。划痕实验在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程,是研究细胞迁移的体外试验方法中zui简单的方法。

1.png

 

传统的划痕实验,是细胞在培养孔中贴壁后,使用移液枪的枪头在贴壁细胞的中间划过,人为造成一道伤口(划痕),之后定时测量划痕的宽度,进而得到伤口愈合的细胞迁移数据。但是这种方式存在难以避免的缺陷:首先,因为是手动划痕,难以准确测量划痕的宽度,也无法保证每次划痕的一致性;其次,在划细胞的同时可能会对划痕的边缘细胞造成机械损伤,影响细胞的迁移和伤口的愈合。

 

艾美捷科技(Cell Biolabs中国区推荐代理)细胞划痕试验试剂盒,使用伤口愈合插件(insert)制造均一笔直的划痕。

 

名称

CytoSelect 24-Well Wound Healing Assay

24-孔细胞划痕试验试剂盒

Cat#

CBA-120

组分

1. 24-well Wound Healing Assay Plate

2. Cell Stain Solution

3. DAPI Fluorescence Stain (1000X)

4. Fixation Solution

原理

24孔板包含12个经过zhuanli处理的塑料插件,培养细胞至形成单层状态后,移除插件,即可得到2块细胞区域之间的笔直又均一的划痕(0.9mm,用于测量细胞的迁移和增殖率。迁移细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。细胞增殖和迁移率可以使用手动固定和显微成像来确定。试剂盒中提供了固定液,用于在特定时间点终止细胞的迁移。还同时提供了细胞染色剂和 DAPI染料,便于通过光学和荧光显微镜查看结果。

计算

1.伤口闭合百分比= Migrated Cell Surface Area / Total Surface Area x 100(备注:Total Surface Area =0.9mm x length Migrated Cell Surface Area = length of cell migration (mm) x 2 x length 

2.迁移率=length of cell migration(nm)/migration time(hr)

结果图

4.png

 

 

原理流程图:

2.png

 

24孔板(12插件)示意图:

3.png

 

你还在手动划痕吗?该划痕实验试剂盒,使用伤口愈合插件(insert)制造均一笔直的划痕,实验重复性好,也不会刮坏细胞,也不会造成划痕的边缘的细胞有机械损伤。




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