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划痕实验之细胞划痕试验试剂盒解决方案 点击：491 | 回复：0



amyjetamy

    
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发表于：2021-08-04 16:34:43
楼主

细胞划痕是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。划痕实验在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程，是研究细胞迁移的体外试验方法中zui简单的方法。

1.png

 

传统的划痕实验，是细胞在培养孔中贴壁后，使用移液枪的枪头在贴壁细胞的中间划过，人为造成一道伤口（划痕），之后定时测量划痕的宽度，进而得到伤口愈合的细胞迁移数据。但是这种方式存在难以避免的缺陷：首先，因为是手动划痕，难以准确测量划痕的宽度，也无法保证每次划痕的一致性；其次，在划细胞的同时可能会对划痕的边缘细胞造成机械损伤，影响细胞的迁移和伤口的愈合。

 

艾美捷科技（Cell Biolabs中国区推荐代理）细胞划痕试验试剂盒，使用伤口愈合插件（insert）制造均一笔直的划痕。

 

名称

CytoSelect 24-Well Wound Healing Assay

24-孔细胞划痕试验试剂盒

Cat#

CBA-120

组分

1. 24-well Wound Healing Assay Plate

2. Cell Stain Solution

3. DAPI Fluorescence Stain (1000X)

4. Fixation Solution

原理

每24孔板包含12个经过zhuanli处理的塑料插件，培养细胞至形成单层状态后，移除插件，即可得到2块细胞区域之间的笔直又均一的划痕（0.9mm）,用于测量细胞的迁移和增殖率。迁移细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。细胞增殖和迁移率可以使用手动固定和显微成像来确定。试剂盒中提供了固定液，用于在特定时间点终止细胞的迁移。还同时提供了细胞染色剂和 DAPI染料，便于通过光学和荧光显微镜查看结果。

计算

1.伤口闭合百分比= Migrated Cell Surface Area / Total Surface Area x 100（备注：Total Surface Area =0.9mm x length ；Migrated Cell Surface Area = length of cell migration (mm) x 2 x length ）

2.迁移率=length of cell migration(nm)/migration time(hr)

结果图

4.png

 

 

原理流程图：

2.png

 

24孔板（12插件）示意图：

3.png

 

你还在手动划痕吗？该划痕实验试剂盒，使用伤口愈合插件（insert）制造均一笔直的划痕，实验重复性好，也不会刮坏细胞，也不会造成划痕的边缘的细胞有机械损伤。


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