在使用仪器前，对仪器先要调零校准，参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常，用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时，基体中虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必须保证其不影响测试。

在做实验的时候，经常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。在色谱分析中，有时基体中可能存在一个以上的和被测组分相距较远的色谱峰，计算机在数据处理中不会计入它们，不影响测定。

例如：在做铁离子含量分析时，以所含铁离子多少为例： 参比溶液与测量溶液就相差铁离子含量，在测量之前要用不含铁离子的参比溶液扫描，调整仪器后，然后再测量含铁离子溶液的比色皿，这样测量溶液中的铁离子会形成自己特定的峰值，次峰值与数据库里基准峰值对比就可以得出溶液所含量了。如果数据库中没有铁离子的曲线，那么还需要先用不同铁离子浓度的溶液做工作曲线，然后进行测量。